Indhold

• At træde
• Del 1 af 2: Kontrol af kalibreringen
• Del 2 af 2: Beregning af resultaterne

En pipette er en type laboratorieudstyr, der bruges til at måle og overføre meget små mængder væske. Nøjagtighed og præcision i pipettemåling er nødvendig, fordi enhver afvigelse i de leverede volumener kan påvirke resultaterne af et eksperiment. For at sikre nøjagtighed er det nødvendigt at kontrollere pipettekalibreringen hvert par måneder. Kalibreringsprocessen hjælper med at kontrollere, at udstyret dispenserer de korrekte volumener, så det kan gendannes, hvis det ikke er tilfældet.

At træde

Del 1 af 2: Kontrol af kalibreringen

1. Saml de nødvendige materialer. For at kontrollere kalibreringen af ​​en pipette har du brug for en pipette, pipettespidser, destilleret vand, et bægerglas, termometer, en balance og fade. Balancen skal være mikrogram specifikt til kalibrering af mikropipetter med et maksimum på 1 µl.
   • Du har ikke brug for mere end 5 ml vand. Fyld koppen med vandet.
   • Sørg for, at pipettespidserne passer korrekt.
2. Mål temperaturen på det destillerede vand. Anbring termometeret i vandet og lad det sidde i mindst et minut. Hvis den røde linje på termometeret stadig bevæger sig, skal du lade den stå i endnu et minut. Efter et minut skal du nedskrive temperaturen i en notesbog. Fjern termometeret og tør det, når du er færdig.
   • Vandets temperatur er vigtig for beregningerne, der foretages for at kontrollere kalibreringen.
3. Placer vægten på vægten, og sæt den til nul. Ideelt set bruger du en balance med døre og et isoleret rum. Anbring skålen i rummet, og luk dørene. Hvis der ikke er nogen døre, skal du bare placere skålen på vægten. Tryk på knappen "Zero" eller "Tara", og vent på, at saldoen læser nul.
   • Ved at indstille vægten til nul tages der ikke hensyn til vægten af ​​plastikskålen, og det bliver kun muligt at måle vægten af ​​det, du lægger i skålen.
4. Forbered pipetten til kalibrering. Tør pipetten af ​​med ethanol, før du starter, for at dræbe forurenende stoffer. Sørg desuden for, at pipettespidsen ikke tilstoppes. Placer det rigtige tip på enden, og indstil den lydstyrke, du vil teste.
   • Før kalibrering tester du både det mindste volumen og det største volumen, som pipetten kan dispensere.
5. Skyl spidsen inden kalibrering. Skub knappen ind til det første stop, og indsæt spidsen i det destillerede vand, så ca. 2 mm af det nedsænkes i væsken. Slip knappen for at trække noget væske op, og dispenser derefter væsken igen ved at trykke knappen ned. Gentag dette tre gange for at skylle spidsen.
   • Tryk på knappen til det andet stop for at dispensere væske, der er tilbage i spidsen, og fjern pipetten fra vandet.
6. Tegn kalibreringsvolumen op. Med spidsen ud af væsken skal du trykke på knappen ned til første stop. Anbring ca. 2 mm fra spidsen i destilleret vand, og slip knappen for at trække væsken ind i spidsen. Vent ca. et sekund, før du fjerner spidsen fra vandet.
   • Sørg for, at spidsen er helt nedsænket under hele aspirationsprocessen. Du vil ikke have bobler i spidsen, ellers bliver resultatet ikke korrekt.
7. Dosér væsken i skålen på vægten. Placer spidsen mod bunden af ​​skålen, og tryk knappen ned til første stop. Flyt til et andet sted, lidt væk fra vandet, og tryk på knappen til det andet stop. Hold knappen nede, og løft spidsen af ​​skålen.
   • Hold spidsen på pipetten, fordi du bruger den igen til at foretage flere kalibreringstest. Sørg for, at spidsen ikke rører ved noget.
8. Registrer den vægt, der angiver vægten. Luk døren, hvis du bruger en balance i et isoleret rum. Vent på, at værdierne holder op med at ændre sig. Registrer denne værdi i din notesbog.
   • Det er vigtigt at vente på, at tallet stabiliserer sig, før du skriver det ned. Dine målinger vil være forkerte, hvis du ikke venter.
9. Gentag denne proces, indtil du har taget mindst 10 målinger. Sæt vægten til nul, skyl spidsen, træk den samme lydstyrke, dispenser lydstyrken og registrer derefter vægten. Du har brug for flere optagelser af samme lydstyrke, og så kan du tage gennemsnittet af alle optagelser sammen.
   • Du kan gentage den samme proces med forskellige volumener, så længe du tager flere målinger pr. Volumen.

Del 2 af 2: Beregning af resultaterne

1. Brug formlen til det beregnede volumen. Formlen til beregning af volumen leveret af pipetten er V = w * Z, hvor w er vandets vægt, Z er konverteringsfaktoren baseret på vandets densitet, og V er det beregnede volumen af ​​hvor meget vand der er afleveret.
   • Du kan finde Z-variablen ved at slå vandets tæthed op ved hjælp af den temperatur, der blev registreret ved starten af ​​eksperimentet.
   • For eksempel: Hvis vandets temperatur var 23 ° C, antager du en Z-værdi på 1,0035 µg / mg.
2. Beregn gennemsnittet af de gentagne forsøg. Du skal have afvejet mængden af ​​vand, der udledes af pipetten mindst 10 gange. For at beregne gennemsnittet af alle disse værdier skal du tilføje dem sammen og dele dem med 10. Hvis du har udført mere eller mindre forsøg, skal du tilføje hvert forsøg og dele summen med det samlede antal forsøg.
   • For eksempel: De ti vægte, du har registreret for et 10 µl pipettevolumen, er som følger: 9.89, 10.01, 10.02, 9.99, 9.95, 10.04, 9.96, 10.01, 9.99 og 9.98.
   • Gennemsnittet er: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95+ 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Anvend variablerne i ligningen, og løs den. Når du har bestemt de korrekte værdier for hver variabel, kan du inkorporere dem i ligningen og løse det beregnede volumen. For at løse dette skal du blot gange gennemsnitsvægten af ​​alle testværdier med Z-værdien.
   • For eksempel: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
4. Beregn nøjagtigheden af ​​pipetten. For at beregne nøjagtigheden kan du bruge ligningen A = 100 x V._gns/ V₀ hvor A er pipettens præcision, V._gns det gennemsnitlige beregnede volumen og V.₀ den værdi, du har angivet for pipetten. Nøjagtigheden skal være mellem 99-101%.
   • Hvis pipetten er korrekt kalibreret, skal den beregnede værdi være meget tæt på den aktuelle værdi, du har indstillet på pipetten.
   • For eksempel: A = 100 x V._gns/ V₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Denne pipette er korrekt kalibreret.
5. Send pipetten ind til kalibrering, hvis det er nødvendigt. Hvis din pipette mislykkes med kalibreringstesten, skal du straks stoppe med at bruge den til eksperimenter. Pipetter er meget sarte og dyre dele af laboratorieudstyr. Du kan ikke reparere kalibreringen selv, så du bliver nødt til at sende den ind til korrekt vedligeholdelse. Alternativt kommer nogle virksomheder til dit laboratorium og kalibrerer dine pipetter der.
   • For vedligeholdelse skal du kontakte det firma, der fremstiller dit specifikke pipettemærke.